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放射免疫分析法
IBL、DRG中國(guó)*代理商“深圳科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司”竭誠(chéng)為您服務(wù)

 
根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，以放射性同位素標(biāo)記抗原或抗體，根據(jù)射線的多少定性或定量測(cè)定待檢標(biāo)本中抗體或抗原的量的一種檢測(cè)分析技術(shù).
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主要有兩種:RIA和IRMA
相同: 均為以抗原抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，測(cè)定對(duì)象為物質(zhì)的抗原；
不同:RIA為競(jìng)爭(zhēng)性，標(biāo)記物為抗原
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  結(jié)合部分放射性與待測(cè)抗原濃度呈負(fù)相關(guān),在直角坐標(biāo)系呈曲線
  為了產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng),抗體僅使用結(jié)合50%抗原的量,故靈敏度較免放法低
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IRMA 為 非競(jìng)爭(zhēng)性，標(biāo)記的是抗體，且為過量（高滴度）
結(jié)合部分放射性與待測(cè)抗原濃度呈正相關(guān)，因抗體為過量，不存在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，故結(jié)合在固相物上的放射性計(jì)數(shù)與抗原濃度呈正比，在直角坐標(biāo)系近似直線
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1 RIA 放射免疫: 基于競(jìng)爭(zhēng)法原理
標(biāo)記抗原（Ag*）和非標(biāo)記抗原（Ag）與*抗體（Ab）競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。隨著Ag增加，Ag*與Ab結(jié)合形成Ag*Ab復(fù)合物的放射量降低,二者變化成反比函數(shù)關(guān)系。                 
 

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 2  IRMA 免疫放射:非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合
2.1單位點(diǎn)抗原IRMA原理圖:
 
 先用過量標(biāo)記抗體與待測(cè)抗原進(jìn)行反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物；用固相抗原結(jié)合未結(jié)合標(biāo)記抗體并將其分離, 測(cè)定上清液的放射量
 
2.2雙位點(diǎn)抗原IRMA原理圖:
 
先用固相抗體與抗原結(jié)合，再用過量的標(biāo)記抗體與抗原的另一決定簇結(jié)合，形成固相抗體-抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物，洗棄剩余標(biāo)記抗體，測(cè)固相上放射量。
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德國(guó)IBL放免試劑盒 基本加樣步驟:
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           試劑   （零標(biāo)準(zhǔn)品） S₀   S₁ ~S₅   樣品   標(biāo)記抗體/標(biāo)記抗原
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按說明書依次入試管內(nèi)
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             孵育放置等
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             洗滌液或分離劑 
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              Υ-計(jì)數(shù)器讀數(shù)
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結(jié)果計(jì)算：
  以N/T、B/T計(jì)算NSB、S₀ 結(jié)合百分率，以B/B₀ 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)及待測(cè)物結(jié)合百分率，
在半對(duì)數(shù)座標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并查出樣品值或由自動(dòng)Υ-計(jì)數(shù)儀器直接讀出結(jié)果。
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