丁苯酞對β淀粉樣蛋白(Aβ1-42)處理后U87細胞自噬性死亡的影響。方法方法將U87細胞分為Aβ組、Aβ+丁苯酞組和對照組(空白對照)。Aβ組細胞用Aβ1-42(20μmol/L)處理24 h;Aβ+丁苯酞組細胞用丁苯酞(10μmol/L)預(yù)處理0.5 h后再加入Aβ1-42(20μmol/L)處理24 h。采用MTT法測定細胞活力,檢測Caspase 3活性,采用CM-H2 DCFDA檢測胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,Western blotting檢測LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白表達。結(jié)果與對照組比較,Aβ組U87細胞活力顯著下降(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細胞活力顯著高于Aβ組(P0.05)。對照組、Aβ組和Aβ+丁苯酞組之間Caspase 3活性的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 與對照組比較,Aβ組U87細胞ROS水平顯著升高(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細胞ROS水平顯著低于Aβ組(P0.01)。與對照組比較,Aβ組U87細胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值顯著升高(P0.01);Aβ+丁苯酞組U87細胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值顯著低于Aβ組(P0.01)。結(jié)論丁苯酞通過抑制ROS介導(dǎo)的自噬性死亡發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（elisa）。往預(yù)先包被人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒說明書產(chǎn)品優(yōu)勢
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