褪黑激素試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 通用名稱：褪黑激素檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 英文名稱：Melatonin ELISA 產(chǎn)品規(guī)格：96T 預(yù)期用途： 褪黑激素試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。僅用于科研使用。 檢測原理： 利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競爭性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較就可以定量出未知樣品的量。 組成成分： 數(shù)量 | 標(biāo)記 | 成分 | 1×12×8 | MTP | 微孔板，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。 | 3×2ml | BIOTIN LYO | 褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。 | 3×2ml | ANTISERUM LYO | 褪黑激素抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。 | 1×250ul | ENZCONJ CONC | 酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。 | 1×6×2ml | CAL A-F LYO | 標(biāo)準(zhǔn)品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請見試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。 | 1×2×2ml | CONTROL 1+2 LYO | 質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請見試劑瓶標(biāo)簽。 | 1×100ml | WASHBUF CONC | 洗滌液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液 | 32×13ml | PNPP SUBS | PNPP 即用 | 1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。 | 2×10 | EXTRCOL | 提取柱，即用，C18 RP，1cm3/100mg。另需提取柱可從IBL定購（編號：KEME761） | 3× | FOIL | 封板紙 |
所需材料（未提供） 1）移液器，體積：50; 500ul 2）試管（12×75mm） 3）軌道振蕩器（400-600rpm） 4）旋渦混合器 5）帶儲器的8道移液器 6）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī) 7）離心機(jī)（冷凍離心機(jī)更適宜）：100-200×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker 或Waters）。 8）甲醇（HPLC級） 9）蒸發(fā)離心機(jī) 10）可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長600-650nm） 11）蒸餾水或去離子水 12）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器 儲存條件： 必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。 樣本要求： 血清，血漿（EDTA，肝素） 按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品，血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。 | 儲存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | ≤-70℃ | 避免太陽直射，避免反復(fù)凍融。 | 穩(wěn)定性 | 24小時(shí) | 3個(gè)月 | 1年 |
檢測方法： 注意 | 用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進(jìn)行。下列所述體積為檢測32人份時(shí)所需要的量。 |
凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備： 稀釋/溶解 | 成分 | | 稀釋劑 | 比例 | 備注 | 儲存 | 穩(wěn)定性 | 15ml | 洗滌液 | 150ml | 雙蒸水 | 1：10 | | 2-8℃ | 8周 | | 標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品 | 2.0ml | 雙蒸水 | | 靜置15min，混合時(shí)避免氣泡 | ≤-20℃ | 直至有效期 | | 褪黑激素生物素 | 2.0ml | 已稀釋的洗滌液 | | 靜置15min，混合時(shí)避免氣泡 | 臨時(shí)配置,只能使用一次 | | 褪黑激素抗血清 | 2.0ml | 蒸餾水 | | 靜置15min，混合時(shí)避免氣泡 | 70ul | 酶聯(lián)物 | 5.6ml | 已稀釋的洗滌液 | 1:81 | | 10ml | 未稀釋甲醇 | 100ml | 蒸餾水 | 10%(v/v) | |
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